Tampón de ensayo de radioinmunoprecipitación

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Tampón de ensayo de radioinmunoprecipitación (RIPA buffer) es una tampón de lisis utilizado para Lyse las células y tejidos, para radio inmunoprecipitación ensayo (RIPA).[1][2] Este buffer es mayor desnaturalización de NP-40 o Tritón X-100 lisis de búfer porque contiene el desoxicolato de sodio y SDS de detergentes iónicos como componentes activos y es particularmente útil para la interrupción de las membranas nucleares en la preparación de extractos nucleares. El almacenador intermediario RIPA da bajo fondo pero puede desnaturalizar las quinasas.

Receta

Receta del almacenador intermediario RIPA para total proteína el extracto es como sigue:

  • 50mM Tris (alternativamente, 10mM fosfato de sodio se puede utilizar en su lugar), pH 7-8
  • 150 mM NaCl
  • 0.1% SDS(opcional)
  • 0.5% desoxicolato del sodio
  • 1% Tritón X 100 o NP-40
  • Proteasa inhibidores como el PMSF o inhibidores de la proteasa cóctel que están comercialmente disponible (uso de acuerdo con la guía del fabricante)

Referencias

  1. ^ Alcaraz C, De Diego M, Pastor MJ, Escribano JM (julio de 1990). "Comparación de un ensayo de radioinmunoprecipitación immunoblotting y ELISA para la detección de anticuerpos al virus de la peste porcina africana". J. vet. Diagn. Invertir. 2 (3): 191-6. doi:10.1177/104063879000200307. PMID2094444.
  2. ^ Ngoka LC (octubre de 2008). "Preparación para proteómica del cáncer de mama de la muestra: proteómica y gene ontology revelan dramáticas diferencias en preferencias de solubilización de proteínas de búferes de lisis urea y ensayo de radioinmunoprecipitación". Proteoma Sci 6 (1): 30. doi:10.1186/1477-5956-6-30. PMC2600628. PMID18950484.


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