Vibratome
Un vibratome se utiliza para cortar un cerebro de rata.
A vibratome es un instrumento que es similar a un para Microtomo pero utiliza una cuchilla vibrante para cortar a través tejido. La vibración amplitud, la velocidad y el ángulo de la hoja se pueden controlar. Piezas de tejido fresco o fijo están incrustados en la baja temperatura de gelificación agarosa. (Algunos han tenido éxito sin utilizar la agarosa para incrustar). El bloque resultante de agarosa que contiene la pieza de tejido es entonces pegado a un bloque de metal y secciona mientras sumergido en un baño de agua o buffer. Secciones individuales entonces se recogen con un pincel fino y transferidas a diapositivas o placas de pocillos para tinción.[1]
Ventajas de Vibratome seccionamiento
- No hay necesidad de deshidratar los tejidos antes, así disminuyó la pérdida de constituyentes celulares
- No desordenado parafina incrustación de
- No hay necesidad de deparaffinise y rehidratar las secciones antes de la inmunotinción
- No hay altas temperaturas o tratamientos químicos fuertes que pueden llevar a la inestabilidad del antígeno
- Sin cuchillas de micrótomo especial requeridas
- Menos posibilidades de artefactos causados por consumido incrustar o congelación
- Autofluoresecence creciente del tejido debido a la parafina inclusión ser evitado
- Menos periodo de espera de toma de muestras de tejido a tiempo de immunolabelling
Posibles desventajas de Vibratome seccionamiento
- En lugar de cintas, cada sección se cortan y recogidos que son más delicados y difíciles de manejar.
- Secciones son generalmente más gruesas que los obtenidos con métodos de parafina; penetración de los anticuerpos y otros reactivos puede ser más lenta y así los tiempos de incubación más largos pueden ser necesarios. Además, secciones de espesor pueden ser difíciles a la imagen con el microscopio. (Sin embargo, secciones gruesas son compatibles y a veces incluso deseable si usando microscopia confocal).
- Obtener secciones de vibratome a portaobjetos de vidrio puede ser difícil o imposible, debido al grueso de las secciones.[2]
Referencias
- ^ https://www.vibratome.com/global/manuals/VB100AppNote1.pdf
- ^ https://www4.ncsu.edu/~rgfranks/Franks%20LAB%20PROTOCOLS/Immuno%20histio%20chemistry/Robertson%20vbratmimuno.doc
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