Trichrome
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Este artículo necesita atención de un experto en Biología Molecular y celular. (Agosto de 2009) |
Trichrome, lo que significa "tres colores" fue utilizado como el nombre de un método de tinción (Mallory de trichrome) que diferencialmente color eritrocitos rojo naranja, músculo y colágeno azul.
Ha convertido en un término general para describir cualquier método de tinción histológica que utiliza dos o más colorantes ácidos junto con un "polyacid" para teñir diferencialmente dos materiales básicos en colores contrastantes. La aplicación más común es teñir de rojo las fibras musculares y de fibras de colágeno verdes o azules, Masson trichrome siendo los más utilizados el método. Esto es necesario ya que las fibras de músculo liso pueden ser difíciles de distinguir del colágeno. Además, las biopsias del hígado pueden tener bien colágeno fibras entre las células del hígado y la cantidad de colágeno pueden estimarse basándose en el método de tinción. Métodos trichrome ahora se utilizan para la diferenciación muscular de colágeno, las células alfa hipofisarias de células beta, fibrina de colágeno y de las mitocondrias en las secciones de músculo congelado fresco, entre otras aplicaciones. Ayuda en identificar aumentos en tejido colagenoso (es decir, cambios fibróticos) como en la cirrosis hepática y distinguir tumores derivados de los fibroblastos y las células musculares.[1]
Las técnicas emplean dos o más colorantes ácidos. Normalmente se esperaría que colorantes ácidos sería manchar las mismas proteínas básicas, pero por aplicarlas secuencialmente el patrón de coloración puede ser manipulado por quitar tinte de menos componentes intensamente teñidos con un "polyacid", generalmente molybdophosphoric o tungstophosphoric ácidos. Estos se cree que se comportan como colorantes de gran peso molecular y desplazar fácilmente quitar tinte del colágeno.
Generalmente un tinte rojo en ácido acético diluido se aplica primero para overstain todos los componentes. Luego un polyacid se aplica para quitar el tinte rojo de colágeno y algunos otros componentes de desplazamiento. Se aplica un segundo colorante ácido (azul o verde) en ácido acético diluido que, a su vez, desplaza el polyacid, resultando colágeno teñida en un color contrastante para el colorante inicial utilizado. Si los eritrocitos son ser manchado, se aplica un tinte de color amarillo o naranja de pequeño peso molecular antes de la tinción con el colorante rojo. Se suele aplicar de una solución saturada en etanol al 80% y a menudo en combinación con ácido pícrico (sí mismo un medio de contraste) y un polyacid. Los métodos de explotan diferencias de menor importancia en la reacción del tejido a tintes, densidad, accesibilidad y así sucesivamente.
El tipo de trichrome que tintes y una polyacid se aplican secuencialmente se denomina "multi-step tricomas". Hay dos otras maneras de que estos métodos pueden llevarse a cabo. En los métodos de "un solo paso", los tintes, a veces con y a veces sin un polyacid, se combinan en una única solución. Uno de los más antiguos es el método de van Gieson que tiñe amarillo, con rojo colágeno músculo y el citoplasma. Otra es de Gömöri método que mímico de cerca Masson de trichrome.
Un tercer tipo son los métodos de yellowsolve en el cual primero se aplica un tinte rojo en ácido acético diluido y, a continuación, la sección está muy bien deshidratada para garantizar que no hay humedad. El tinte rojo es desplazado entonces por un tinte amarillo en un solvente, a menudo cellosolve (2-etoxi-etanol), de la cual reciben su nombre: amarillo tinte en cellosolve = yellowsolve. Floxina-tartrazina de Lendrum para inclusiones de la célula es un ejemplo.
Rojo colorantes usados: ácido fucsina ponceau de Xilidina, chromotrope 2R, biebrich escarlata, ponceau 6R, Floxina.
Azules y verdes colorantes usados: luz SF verde amarillento, verde rápido FCF, azul de anilina, metil blue, azul de agua.
Colorantes amarillos utilizados: ácido pícrico, naranja G, amarillo de martius, tartracina, amarillo de fresado.
Referencias
- ^ Lamar Jones, M. «Especial manchas de guía de la educación». Capítulo 10: Dominar el tricrómico. Dako. 2011-05-20.
Baker JR (1958) principios de la microtecnia biológica. Londres: Methuen.
Histoquímica de RW Horobin (1982). Stuttgart: Gustav Fischer.
Histoquímica de comprensión Horobin RW (1988). Chichester: Ellis Horwood.
Kiernan JA (2008) métodos histológicos e histoquímicos, 3ro ed. Bloxham: Scion.
Prento P (2009) tinción de macromoléculas: posibles mecanismos y ejemplos. Biotech. Neuroblasto. 84: 139-158.
H Puchtler, Isler H (1958) el efecto de ácido fosfomolíbdico en el stainability de tejidos conectivos por varios colorantes. J. neuroblasto. Cytochem. 6: 265-270.
Reid PE, Iagallo M, Nehr S, Jankunis M, mecanismo de mañana P (1993) técnicas de tejido conectivo. 1. el efecto de la concentración de tinte y manchas tiempo procedimientos de tinte aniónico. Neuroblasto. J. 25: 821-829.
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