Método de Golgi
Método de Golgi es un tinción de plata técnica descubierta por Italiano médico y científico de la Camillo Golgi (1843-1926) en 1873 que se utiliza para visualizar tejido nervioso bajo microscopia ligera. Inicialmente fue nombrado el reacción negra (la reazione nera) por Golgi, sino se convirtió conocido como la mancha de Golgi o más tarde, método de Golgi.
Golgi' tinción fue utilizada por Español neuroanatomista Santiago Ramón y Cajal (1852-1934) para descubrir una serie de hechos nuevos sobre la organización del sistema nervioso, inspirando el nacimiento de la doctrina de la neurona. En última instancia, Ramon y Cajal mejoró la técnica utilizando un método que llamó "doble impregnación". Técnica de tinción de Ramón y Cajal, aún en uso, se llama mancha de Cajal.
Contenido
- 1 Mecanismo de
- 2 Técnica
- 3 Citar
- 4 Referencias
- 5 Enlaces externos
Mecanismo de
Las células en el tejido nervioso están densamente empaquetado y poca información sobre sus estructuras y las interconexiones pueden obtenerse si todas las células se tiñen. Además, las extensiones filamentary delgadas de células neuronales, incluyendo la Axon y de la dendritas de las neuronas, son demasiado delgado y transparente para verse con técnicas de tinción normales. Método de Golgi tiñe de un número limitado de células al azar en su totalidad. El mecanismo por el cual esto sucede es todavía desconocido.[1] Las dendritas y el soma de la célula, son claramente teñido en marrón y negro y puede ser seguido en toda su longitud, lo que permitió https://www.ehu.es/Lance a rastrear las conexiones entre las neuronas y para hacer visible la estructura de red compleja de muchas partes de la cerebro y médula espinal.
Tinción de Golgi se logra impregnando el tejido nervioso fijo con Dicromato de potasio y nitrato de plata. Las células así manchadas son llenadas por microcrystallization de cromato de plata.
Técnica
Según SynapseWeb,[2] Esta es la receta para la técnica de tinción de Golgi:
- Sumerja un bloque (aprox. 10 x 5 mm) de formol-fija (o paraformaldehido- glutaraldehído al-perfusión) del tejido del cerebro en una 2% de solución acuosa de dicromato de potasio por 2 días
- Seca del bloque breve con papel de filtro.
- Sumergir el bloque en una solución acuosa al 2% de nitrato de plata por otros 2 días.
- Corte secciones de aprox. 20-100 µm de espesor.
- Deshidratarse rápidamente en etanol, claro y el montaje (por ejemplo, en Depex o Enthalan).
Esta técnica ya que ha sido refinada para sustituir el precipitado de plata con oro por inmersión luego de la muestra de cloruro de oro ácido oxálico, seguido por el retiro de la plata de tiosulfato de sodio. Esto conserva un mayor grado de estructura fina con los detalles ultraestructurales marcados por pequeñas partículas de oro. [1]
Citar
Ramón y Cajal dijo del método de Golgi:
- Expresó la sorpresa que experimenté al ver con mis propios ojos los maravillosos poderes reveladoras de la reacción cromo-plateado y la ausencia de cualquier emoción en el mundo científico por su descubrimiento.
- Recuerdos de mi vida, Vol. 2, Historia de mi labor científica. Madrid: Moya, 1917, p. 76.
Referencias
- ^ Nicholls, J. G. (2001). De la neurona al cerebro. Asociados de Sinauer. p. 5. ISBN0878934391.
- ^ Spacek, J., Fiala, J. (2002-06-28). "Visualización de espinas dendríticas". SynapseWeb. 2010-06-17.
Enlaces externos
- Microfotografía de una célula de la corteza manchada con de Golgi. Galería de imágenes de IHC.
- Impregnaciones de Golgi. Imágenes del cerebro de las moscas.
- Visualización de espinas dendríticas método de Golgi. SynapseWeb. Incluye un estudio Time-lapse de impregnación de Golgi.
- Berrebi, Albert: Biología de las neuronas de la célula: estructura y métodos de estudio. (en PDF)
- Imágenes cerebro manchado que incluyen las "tinción de Golgi neuronas" en el BrainMaps proyecto