Construcción de la función de separador de lípidos

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1 Fig. Analogía estructural de un girasol a modelos de llenado de espacio de las construcciones de la FSL. Las dos construcciones FSL de la izquierda son FSL-péptidos basado en parcialmente carboxymethylated oligoglycine (CMG2) espaciadores con lípidos 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (droga). Las construcciones de 3ª y 4ª son FSL-biotina basado en CMG pero con DROGA y esteroles (δ-oxycarbonylaminovaleric derivado de ácido de colesterol) lípidos, respectivamente. La construcción final de la FSL es un trisacárido típico, conjugado a través de un espaciador O (CH2) 3NH un derivado activado adipato de los lípidos de Diacilo droga.

Construye la función de separador de lípidos (FSL construcciones) son amphiphatic, agua dispersables biosurface Ingenieria construcciones que pueden utilizarse para diseñar la superficie de células de, virus y organismos, o modificar las soluciones y las superficies no-biológica con bioactivos.[1][2] FSL construcciones espontáneamente y estable se incorporan en las membranas celulares. FSL se construye con todas estas dichas características también son conocidos como KODE ™ construye.[1] El proceso de modificación de superficies con FSL construcciones se conoce como "koding" y el resultante "koded" células de,[1] virus y liposomas se conocen respectivamente como kodecytes,[1][3] kodevirions[1][4] y kodesomes.

Contenido

  • 1 Descripción de la tecnología
  • 2 Diseño flexible
    • 2.1 Grupos funcionales
    • 2.2 Espaciadores
    • 2.3 Lípidos
  • 3 Optimizar la presentación de grupo funcional (F)
  • 4 Mecanismos de interacción
    • 4.1 Construcción de Amphiphilic FSL
    • 4.2 Modificación de la membrana lipídica
    • 4.3 Interacción superficial No-biológicos
  • 5 Características de la tecnología
    • 5.1 Soluciones y las superficies de las membranas Koded
  • 6 Metodología para el uso FSL (koding)
  • 7 Aplicaciones
    • 7.1 Kodecytes
    • 7.2 Kodevirions
    • 7.3 Kodesomes
    • 7,4 Koded soluciones
    • 7.5 Koded superficies
  • 8 Véase también
  • 9 Enlaces externos
  • 10 Referencias

Descripción de la tecnología

Todos superficies vivas están decoradas con una gama diversa de moléculas complejas, que son moduladores claves de comunicaciones químicas y otras funciones tales como protección, adherencia, infectividad., apoptosis, etc.. Pueden ser construcciones funcional-separador-lípidos (FSL) sintetizada imitan los componentes bioactivos presentes en las superficies biológicas, y luego volver a presentarlos de forma inédita.[1][2]

La arquitectura de un constructo FSL es análoga a un plantas con flores en que tienen tres elementos estructurales, con cada componente tiene un propósito separado.[1][2] En los ejemplos mostrados en las figuras un girasol se ha utilizado para la analogía. Sin embargo, se debe apreciar que esto es sólo una representación y la verdadera similitud estructural es variada significativamente entre flores y construcciones FSL (fig 2). El grupo funcional de un FSL es equivalente a un cabeza de la flor, en la extremidad y llevar los componentes funcionales. El espaciador de la FSL es equivalente a la tallo de la flor y las hojas en el tallo son representativos de sustituciones que pueden ser diseñadas en la composición química del espaciador. El lípido de la FSL ancla a las membranas del lípido y da el constructo FSL su amphiphatic naturaleza que puede causar que uno mismo-montar. Porque la cola de lípidos puede actuar directamente como un ancla es análoga a la raíz sistema de una planta.

Diseño flexible

El grupo funcional, el espaciador y los componentes de la cola de lípidos del constructo FSL pueden cada ser individualmente diseñados resultando en FSL construcciones con funciones biológicas específicas.[2] El grupo funcional principal es generalmente el componente bioactivo de la construcción y los diferentes espaciadores y lípidos influencian y efectúan de su presentación, orientación y localización sobre una superficie. Crítico a la definición de un constructo FSL es el requisito para ser dispersables en el agua y de forma espontánea y estable incorporan en las membranas celulares. Otros lípidos bioconjugates que incluyen componentes similares a FSLs pero no tienen estas características no son llamados como construye la función de separador de lípidos.[2]

Grupos funcionales

2 Fig. Diagrama que muestra las características de la construcción de la función de separador de lípidos de una kodecyte, usando la analogía de un girasol. Como se indica en la figura, el grupo de función análogo a la cabeza de la flor puede disponerse de diferentes sustancias, el espaciador análogo a la del tallo (incluyendo las hojas) puede tener una variedad de diferentes características, y el lípido puede ser una variedad de diferentes lípidos. Los tres componentes de la función, espaciador y lípidos constituyen el constructo de la FSL.

Una gran variedad de grupos funcionales se han hecho ya en FSL construye. Estos incluyen:

  • Hidratos de carbono – que van desde monosacáridos Para polisacáridos y grupo sanguíneo antígenos,[1][2][5][6][7][8][9][10][11] ácido hialurónico oligómeros y ácido siálico residuos[2]
  • Péptido de la proteína – que van desde la simple los aminoácidos[7][12][13][14] Para proteínas tan grande como anticuerpos[1]
  • Etiquetas – incluyendo fluoróforos,[1][2][4][8][9][15] radioisótopos de,[1][4] biotina,[1][2][8][9] etc.
  • Otros – química fracciones tales como maleimida,[14][16] Haga clic en residuos, PEG, cargado de compuestos

Nota 1: Multimérica – la presentación de los residuos de F puede ser como Multímeros con controlar el espaciado y ser variable.

Nota 2: Masa-la masa que puede ser anclada por un FSL construcciones pueden ir desde 200 a > 1 x 106 Da

Espaciadores

El separador es una parte integral de la construcción FSL y le da varias características importantes, incluyendo el agua dispersabilidad.[2]

  • Longitud -el espaciador puede variar en longitud, por ejemplo 1.9 nm (Ad), 7.2 nm (CMG2), 11,5 nm (CMG4),[2] permitiendo mayor presentación de grupos funcionales en el biosurface.
  • Optimiza la presentación F – La presentación de los bioactivo (grupo funcional) en un distanciador reduce impedimento estérico y aumenta las superficies bioactivas expuestas y disponibles para las interacciones
  • Rigidez -el espaciador puede ser modificado para ser flexible o rígido dependiendo de las características deseadas
  • Sustituciones(representado por las hojas en el tallo), el separador puede ser modificado tanto en carga, y polaridad.
  • Sucursales – generalmente el espaciador es lineal, pero también puede ser ramificado como espacio específico de las ramas para optimizar la presentación y la interacción del Grupo F.
  • Inerte – es importante para el diseño de construcciones FSL la naturaleza biológicamente inerte del espaciador. Lo importante es que esta característica significa que los componentes S L de los constructos son no reacciona con el suero sin diluir. Por lo tanto las construcciones son compatibles en vivo uso y puede mejorar la sensibilidad del ensayo diagnóstico permitiendo el uso de suero sin diluir.

Lípidos

El lípido la cola es esencial para permitir la membrana lipídica inserción y retención sino también para dar la construcción anfifílicas características que permiten hidrófilo capa superficial (debido a la formación de capas bilipid). Diferentes lípidos de membrana que puede utilizarse para crear FSLs tienen características fisicoquímicas diferentes de la membrana y por lo tanto puede afectar la función biológica de la FSL. Lípidos en FSL construcciones incluyen:[2]

  • Diacil/diakyl por ejemplo, droga
  • Esteroles de por ejemplo, colesterol
  • Ceramidas

Optimizar la presentación de grupo funcional (F)

3 Fig. Diagrama de comparación de la presentación de antígenos de inmunoensayos entre una típica conexión directa y en un función-espaciador-lípido (por analogía a una flor).

La imagen superior muestra el antígeno (cabeza de la flor) presentado en una variedad de formatos directamente sobre una superficie sólida. La construcción se conecta aleatoriamente a la superficie sólida.

La imagen inferior muestra el mismo antígeno (cabeza de la flor) en orientación óptima como un constructo FSL con un espaciador (tallo) manteniéndola lejos de la superficie sólida. La cola de lípidos (raíces) hace que la construcción unir a la superficie sólida.
4 Fig. Combinaciones de diferentes espaciadores, lípidos y otras modificaciones pueden utilizarse para optimizar la funcionalidad del grupo de función en la construcción de la FSL.

En todos los diagramas, el mismo grupo funcional está representado por la cabeza del girasol. Los cuatro primeros ejemplos muestran monomérica presentación de F, con el primer ejemplo que representa el 1.9nm corto (Ad) espaciador (el tallo de la flor). El segundo y el cuarto con los tallos más largos (espaciadores) representando el CMG2 7.2nm espaciador y CMG4 11.5nm espaciadores respectivamente. Las construcciones de segunda y terceros tienen los separadores de la mismos, pero la cola de lípidos de la tercera construcción es colesterol, en lugar de DROGA.

Últimos tres todos los ejemplos basados en CMG2 espaciadores (tallos), con una cola de lípidos de droga (raíces) son multiméricas presentaciones de F. La primera de ellas es una simple duplicación del Grupo F, mientras que el siguiente tiene un espaciador adicional entre los grupos F. La construcción final es una presentación del cluster.

Una de las funciones importantes de una construcción FSL es que puede optimizar la presentación de antígenos, tanto en las superficies celulares y membranas de fase sólida. Esta optimización se consigue principalmente por el espaciador y secundariamente por la cola de lípidos. En un típico inmunoensayo de el antígeno se deposita directamente en la microplacas de superficie y se une a la superficie que de manera aleatoria, o en una orientación preferida dependiendo de los residuos presentes en la superficie de este antígeno (Fig. 3). Este proceso de la deposición suele ser incontrolado. En contraste, la construcción FSL cuando enlazada a una microplaca presenta el antígeno de la superficie en una orientación con un alto nivel de exposición al medio ambiente. Además inmunoensayos típicos usan recombinante péptidos en lugar de antígenos péptidos discretos. Como el péptido recombinante es muchas veces mayor que la epitopo de interés, un montón de secuencias de péptidos no deseados y no deseados también están representados en la microplaca. Estas secuencias adicionales pueden incluir secuencias relacionados con microbios no deseadas (según lo determinado por un BLAST Análisis) que puede causar problemas de reactividad cruzada de nivel bajo. El mecanismo por el cual un inmunoensayo es capaz de superar esta actividad bajo nivel suele diluir el suero para que el bajo nivel de microbios reactiva anticuerpos son no vistos, solo alto nivel específicos anticuerpos y provocar un resultado interpretable. En contraste, FSL construcciones suelen utilizan específicamente fragmentos de péptido seleccionado (hasta 40 aminoácidos),[14][16] tal modo superar la reactividad cruzada con secuencias microbianas y permitiendo el uso de aceite puro suero (lo que aumenta sensibilidad).

El componente de F puede ser reforzado por presentación de él en multiméricas formatos y con espaciamiento específico. Los cuatro tipos de formato multimérica incluyen unidades de repetición lineales, lineales unidades que se repiten con espaciado, racimos y ramificación (Fig. 4).

Mecanismos de interacción

Figura 5a Corte transversal esquemático de FSL micelas de. FSL construir por la naturaleza de su composición en poseer ambos hidrofóbico y hidrófilo regiones es anfifílicas (o amphiphathic). Esta característica determina la manera en que la construcción va a interactuar con las superficies. Cuando se presenta en una solución pueden formar micelas simples o adoptar estructuras más complejas de la bicapa
Figura 5b Superficie hidrofóbica Capa de FSL. La cola hidrofóbica lipídica de un constructo FSL se interactúan y ancla FSL construcciones directamente sobre superficies hidrofóbicas.
Figura 5c Superficie hidrofílica Capa de FSL. El hidrofóbico cola de lípidos de un constructo FSL no interactuará directamente con superficies hidrofílicas. En cambio, debido a la anfifílicas naturaleza de la FSL, la construcción se forma espontáneamente en una bicapa. La superficie de la bicapa será hidrofílica, lo que le permite interactuar y ancla los FSLs a la superficie hidrofílica.

Construcción de Amphiphilic FSL

El constructo FSL, por la naturaleza de su composición en poseer hidrofóbicas e hidrofílicas regiones son anfifílicas (o anfipáticos). Esta característica determina la manera en que la construcción va a interactuar con las superficies. Cuando se presenta en un solución forman simples micelas de o adoptar estructuras más complejas de la bicapa con dos ejemplos simples de Figura 5a. Se espera que las estructuras más complejas. No se ha determinado la naturaleza real de micelas de FSL. Sin embargo, basado en la función estructural normal de micelas, se prevé que se determinará en parte por la combinación de grupo funcional, espaciador y lípidos junto con temperatura, concentración, tamaño y hidrofilia/hidrofobia para cada tipo de construcción FSL.

Recubrimientos de superficie se producirán a través de dos mecanismos teóricos, siendo el primero directo interacción hidrofóbica de la cola de lípidos con una superficie resultando en un monocapa de FSL en la superficie (Fig. 5b). Enlace hidrófobo de la FSL será a través de su cola de lípidos hidrofóbicos interactúan directamente con el (hidrofóbicolipofílicas) superficie. La segunda capa de la superficie será a través de la formación de bicapas como la cola de lípidos es capaz de reaccionar con la superficie hidrofílica. En este caso los lípidos inducen la formación de una bicapa, la superficie de los cuales será hidrofílica. Esta membrana hidrofílica luego interactúa directamente con la superficie hidrofílica y probablemente se encapsula fibras. Este enlace hidrofílico bicapa es el mecanismo previsto que FSLs son capaces de unirse a las membranas fibrosas tales como papel[17] y fibras de vidrio (Fig. 5c) y (Fig. 9).

Modificación de la membrana lipídica

Figura 6a A membrana plasmática modificado con construcciones FSL (por analogía al girasol), creando un kodecyte membrana.
Figura 6b Construcciones FSL (por analogía al girasol) insertadas a través de su cola de lípidos (raíces) en una liposoma. El espaciador de la FSL (tallo) tienen el grupo funcional de los FSL (cabeza de la flor) de la superficie.

Después de etiquetar de la superficie con el seleccionado F bioactivos (s) las construcciones estarán presentes y orientados en la superficie de la membrana. Se espera que sea altamente móvil dentro de la membrana la FSL y afectará a la elección de la cola de lípidos son relativa partición dentro de la membrana.[2][6] La construcción a menos que tenga comportamiento del flip-flop se espera que permanezca la superficie presentada. Sin embargo, la modificación no es permanente en las células vivas y las construcciones se perderán (consume) a un ritmo proporcional a la actividad de la membrana y tarifa de la división de la célula (con células muertas quedan muy marcados).[1] Adicionalmente al presente en vivo con lípidos séricos FSLs se procederá a la elución de la membrana en el plasma a una velocidad de cerca de 1% por hora.[4][9] En las células fijas o inactivas células (por ejemplo rojo) almacenadas en suero medios libres las construcciones se conservan normalmente.[1]

Liposomas son koded fácil simplemente añadiendo que FSL se construye en la preparación. Kodesomes con microplacas u otras superficies de contacto puede causar la rotulación de la superficie de microplaca.

Interacción superficial No-biológicos

Revestimientos de superficies no-biológico se producirán a través de dos mecanismos, siendo el primero directa interacción hidrofóbica de la cola de lípidos con una superficie hidrofóbica dando lugar a una monocapa de FSL en la superficie. La segunda capa de la superficie será a través de la formación de bicapas, que probablemente sea encapsular fibras o ser vía el grupo hidrofílico de F. Este es el mecanismo previsto por que FSLs atar a las membranas fibrosas tales como papel[17] y fibras de vidrio.

Características de la tecnología

Las características tecnológicas de FSL construcciones y el proceso koding pueden resumirse como sigue:

  • Rápido y simple – contacto simple para 10 y 120 minutos y construcciones incorporan espontáneamente y estable – no lavado necesaria.[1]
  • Replicable – mismas variables (tiempo, temperatura, concentración) es igual al mismo resultado.[1][5]
  • Toxicidad -Son construcciones FSL biocompatibles, dispersan en soluciones biológicas sin disolventes, detergentes. Ellos no-covalente de la etiqueta y no genéticos. Normal vitalidad y funciones se mantienen en las células/viriones/organismos modificados.[6][8][9][15] Experimentos de toxicidad/vitalidad en animales de laboratorio pequeños, pez cebra, cultivos celulares, espermatozoides y embriones encontrar no tóxicos efectos dentro de rangos fisiológicos.
  • Anfifílicas – la anfifílicas naturaleza de la FSL construir hace ellos agua dispersible (clara solución de micelas), sin embargo, una vez que interactuaba con una membrana que insertar capa y convertirse en resistente al aguas
  • Diseño variable – un F solo puede presentarse en más de 100 maneras variando el espaciador y lípidos.
  • Biovisibility alta – como el espaciador tiene la molécula F lejos de la membrana es capaz de lograr una mayor sensibilidad, especificidad y reactividad pueden ser optimizados por el uso de múltiples y presentaciones de biomarcadores variable sobre la misma superficie.
  • Aditivo – Modificación FSL es compatible con otras tecnologías permitiendo a los usuarios agregar características adicionales a las células/virus/organismos/superficies ya modificadas por métodos más tradicionales. Múltiples construcciones FSL se pueden añadir a una superficie simultáneamente creando simplemente una mezcla de construcciones de la FSL. Construcciones Inserte (células vivas o fijasglutaraldehído al) las membranas.
7 Fig. FSLs pueden crearse fácilmente de cisteína-que contienen péptidos, proteínas o cualquier otro tioles de interés biológico. La mezcla de una cisteína que contiene péptidos con FSL-RFG(Maleimide), en 4MMF tampón, permite que el péptido reaccionar con el maleimida residuo de la FSL (a través de la conocida Reacción de adición nucleófila de Michael). Después de incubación durante la noche luego de secado al vacío, se crea un péptido FSL. No hay purificación es necesaria.
  • Simple síntesis de péptidos FSL – hay una construcción FSL de grupos reactivos funcionales con maleimida como su grupo funcional que puede ser utilizado para preparación de FSLs de cisteína-que contienen péptidos, proteínas o cualquier otro tioles de interés biológico.[14][16] El enfoque sintético eficaz se basa en el bien conocido Michael nucleófila Además de maleimides (Fig. 7).
  • Sintético "Gylcolipids" – familia una de las construcciones FSL son sintéticos glicolípidos con colas hidrofóbicas bien definidos y grupos principales de hidratos de carbono

Soluciones y las superficies de las membranas Koded

FSL constructos tienen una amplia gama de usos y se han utilizado para modificar lo siguiente:

  • Células de – células de la sangre,[1][2][3][5][7][8][9][10][11][12][13][14][17][18] líneas de la cultura,[1] embriones,[1] espermatozoides[1]
  • Virus[4] – la gripe,[2] contra el sarampión, varicela
  • Organismos – parásitos, microbios, pez cebra[15]
  • Liposomas – también micelas, las partículas lipídicas[8]
  • Fibras de las superficies – membranas hidrofóbicas o hidrofílicas/fibras, papel,[17] nitrocelulosa, algodón, seda, vidrio, Teflón, sílice, etc..
  • Soluciones -solución salina, plasma, suero, medios de cultivo

Metodología para el uso FSL (koding)

8 Fig. Preparación de la kodecytes/kodevirions. Simplemente mezclar células/viriones con una solución FSL (contiene 1 o más FSLs) e incubar durante 10 – 120 minutos a 37 ° C (o a temperaturas tan bajas como 4 ° C). Las construcciones se incorporan espontáneamente en la membrana y más pasos no son necesarios.

Construcciones FSL, cuando está en solución)solución salina) y en contacto, espontáneamente se incorporan en las membranas de la célula y el virus.[1] La metodología implica simplemente preparar una solución de construct(s) FSL en el rango de 1-1000 µg/mL. La concentración real dependerá de la construcción y la cantidad de construcción requerido en la membrana. Una parte de solución FSL se agrega a una parte de las células (hasta 100% suspensión) y se incuban a una temperatura dentro del rango de 4 – 37 ° C (39-99 ° F) dependiendo de la compatibilidad de la temperatura de las células está siendo modificado. A mayor temperatura, más rápido la tasa de inserción de FSL en la membrana. Para glóbulos rojos, a 37 º C incubación durante 2 horas alcanza > inserción de 95% con al menos 50% inserción están alcanzando a los 20 minutos. En general, tiempo de inserción de FSL de 4 horas a temperatura ambiente o 20 horas a 4 ° C da resultados similares a la de 1 hora a 37 ° C para carbohidratos basados FSLs insertando en las células de sangre rojas.[1] La resultante kodecytes o kodevirions no no requiere ser lavado, sin embargo se debe considerar esta opción si se utiliza un exceso de construcción de FSL en el proceso de koding.

Aplicaciones

FSL construcciones se han utilizado para la investigación y desarrollo, diagnóstico productos y están actualmente siendo investigado como potencial terapéutica agentes.

Kodecytes

Artículo principal: Aplicaciones Kodecyte

FSL se han utilizado para crear kodecytes de eritrocitos humanos que se han utilizado para detectar e identificar grupo sanguíneo allo-anticuerpos[12][13][14] como ABO subgrupo a los imitadores,[10] Sistemas de control de calidad de ABO,[3] serológica kits de enseñanza[11] y un sífilis diagnóstico.[18] Kodecytes murinos se han utilizado experimentalmente para determinar en vivo supervivencia de la célula,[9] y crear el modelo reacciones de la transfusión.[8][9] Kodecytes de pez cebra se han utilizado para determinar en tiempo real en vivo migración de la célula.[15] Kodecytes se han utilizado para crear diagnósticos de influenza.[2] Kodecytes que han sido modificados con FSL-GB3 no podían ser infectados con el Virus del VIH.[6][19]

Kodevirions

Artículo principal: Aplicaciones Kodevirion

Kodevirions son virus FSL modificado. Varias construcciones FSL se han utilizado para virus de etiqueta para asistir a sus visualización de la citometría de flujo[4] y seguirlo en tiempo real distribución en modelos animales.[4] También se han utilizado para modificar la superficie del virus con la intención de dirigidos a ser utilizados para unir tumores (oncolítico).[4]

Kodesomes

Kodesomes son liposomas que han sido decoradas con FSL construye. Estas han sido utilizadas para depositar construcciones FSL en microplacas para crear diagnóstico ensayos de. También tienen el potencial para el uso terapéutico.[20]

Koded soluciones

Estas son soluciones que contienen construcciones FSL donde existirá el constructo como una dispersión de micellular claro. FSL-GB3 como un gel o solución se ha utilizado para inhibir la infección por el VIH[6] y para neutralizar Toxina de Shiga.[6] FSL sangre grupo A una solución se ha utilizado para neutralizar los anticuerpos circulantes en un ratón modelo y permiten (grupo de sangre incompatibles Amurine transfusión de kodecytes).[8] Este experimento de modelo fue utilizado para demostrar el potencial de FSLs para neutralizar anticuerpos circulantes y permitir la transfusión de sangre incompatible o trasplante de órganos.[17]

Koded superficies

9 Fig. FSL construcciones pueden imprimirse con un impresora inkjet de escritorio estándar directamente sobre el papel para crear inmunoensayos. Imagen es un típico ejemplo de una de inyección de tinta imprime enzimoinmunoanálisis (EIA) donde 12 diferentes construcciones FSL impreso como identificación de códigos en un papel y luego reaccionó contra diferentes muestras. La actividad de anticuerpo en las muestras puede identificarse por la aparición de palabras identificar el antígeno Diana. Un cartucho de tinta vacío se llena con una construcción FSL y palabras, códigos de barras o gráficos se imprimen. A Plexiglás plantilla se adhiere a la superficie para crear pozos de reacción. El método es entonces una norma EIA procedimiento, pero el bloqueo de suero no es necesario y puede utilizarse suero no diluido. Un procedimiento EIA típico es como sigue: agregar suero, incubar, lavar por inmersión, añadir EIA secundaria anticuerpo de detección, incubar, lavar, añadir NBT/ BCIP precipitando el substrato y la parada de la reacción cuando desarrollado por lavado. El resultado final es estable por años.

Todos FSL dispersar en agua y por lo tanto son compatibles con impresoras de inyección de tinta. Construcciones FSL se pueden imprimir con una impresora de escritorio estándar de inyección de tinta directamente sobre el papel para crear inmunoensayos.[17] Un cartucho de tinta vacío está lleno de palabras y una construcción FSL códigos de barras, o se imprimen gráficos. A Plexiglás plantilla se adhiere a la superficie para crear pozos de reacción. El método es entonces una norma EIA procedimiento, pero el bloqueo de suero no es necesario y puede utilizarse suero no diluido. Un procedimiento típico es el siguiente: Añadir suero, incubar, lavar por inmersión, añadir secundario conjugado EIA, incubar, lavar, añadir NBT/BCIP precipitar el substrato y la parada de la reacción cuando desarrollado por lavado (Fig. 9). El resultado final es estable por años.

Véase también

  • Kodevirion
  • Kodecyte

Enlaces externos

  • FSL construye: Un método Simple para modificar celulares/virión las superficies con un rango de biológicos marcadores sin que afecten a su viabilidad -Diario del artículo video gratis visualizar experimentos (JOVE)

Referencias

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  2. ^ a b c d e f g h i j k l m n o p Korchagina, Elena; Tuzikov, Alejandro; Formanovsky, Andrey; Popova, Inna; Henry Stephen; Principales, Nicolai (2012). "Hacia la creación de glycolandscapes de la membrana de la célula con glicanos lípidos construye". Investigación de hidratos de carbono 356:: 238 – 46. doi:10.1016/j.Carres.2012.03.044. PMID22551471.
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