Electrocromatografía capilar

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Electrocromatografía capilar (CEC) es un cromatográfico técnica en la cual la fase móvil es conducida a través de la cama cromatográfica por electroosmosis. Electrocromatografía capilar es una combinación de dos técnicas analíticas, Cromatografía líquida de alto rendimiento y electroforesis capilar. Electroforesis capilar pretende separar analitos sobre la base de su masa para cargar cociente al pasar un alto voltaje entre extremos de un tubo capilar, que se llena con el analito. Cromatografía líquida de alto rendimiento separa analitos por pasarlos, bajo alta presión, a través de una columna llenada de fase estacionaria. Las interacciones entre los analitos y la fase estacionaria y fase móvil conducir a la separación de los analitos. En Electrocromatografía capilar los capilares, con fase estacionaria de HPLC, son sometidos a un alto voltaje. Separación se logra por la migración electroforética de solutos y la partición diferencial.

Contenido

  • 1 Principio de
  • 2 Instrumentación y trabajo
  • 3 Ventajas
  • 4 Véase también
  • 5 Referencias

Principio de

Electrocromatografía capilar (CEC) combina los principios utilizados en HPLC y la CE. La fase móvil es impulsada a través de la cama cromatográfica mediante electroósmosis en lugar de presión (como en HPLC). Electroosmosis es el movimiento de líquido inducida por un potencial aplicado a través de un material poroso, tubo capilar, la membrana o cualquier otro conducto de fluido. Flujo Electroosmotic es causada por la Fuerza del culombio inducida por un campo eléctrico sobre la carga eléctrica móvil net en una solución. Bajo alcalina condiciones, la superficie silanol grupos de la silicona fundida se ser ionizados conduce a una superficie cargada negativamente. Esta superficie tiene una capa de iones positivamente cargados en proximidad cercana que son relativamente inmovilizado. Esta capa de iones se denomina el Capa de Stern. El espesor de la capa doble es dada por la fórmula:

Δ = [εr εo RT / 2cF²] ½

Donde:

Εr = constante dieléctrica o permitividad relativa del medio εo = permitividad de un vacío R = constante de gas universal
T = temperatura absoluta
c = concentración molar
F = Constante de Faraday

Cuando un campo eléctrico se aplica a los líquidos (generalmente a través de electrodos colocados en las entradas y salidas), la carga neta en la doble capa eléctrica es inducida a moverse por la fuerza del culombio resultante. El flujo resultante se denomina flujo electroosmotic. En CEC iones positivos del electrolito añadido junto con el analito se acumulan en la doble capa eléctrica de las partículas de la columna en la aplicación de un campo eléctrico se mueven hacia el cátodo y arrastre de la fase móvil líquida con ellos.

La relación entre la velocidad lineal u del líquido en el capilar y el campo eléctrico aplicado es dada por la Ecuación de Smoluchowski como sigue:

u = εrεoζEη

Donde:

Εr = constante dieléctrica o permitividad relativa del medio εo = permitividad de un vacío ζ = potencial a través de la capa de Stern (Zeta potencial) E = Intensidad de campo eléctrico
Η = Viscosidad del solvente

Separación de componentes de CEC se basa en las interacciones entre la fase estacionaria y la migración electroforética diferencial de solutos.

Instrumentación y trabajo

Figura 1. Diagrama del mecanismo de Electrocromatografía capilar

Los componentes básicos de una electrochromatograph capilar son una muestra frasco, ampollas de origen y de destino, un capilar lleno, electrodos, un fuente de alimentación de alto voltaje, un detector y una salida de datos y el dispositivo de manipulación. El frasco de la fuente, destino vial y capilares están llenos de un electrolito como una solución buffer acuosa. El capilar está repleto de fase estacionaria. Para introducir la muestra, la entrada del capilar es colocada en un frasco que contiene la muestra y volvió al frasco de la fuente (la muestra se introduce en el tubo capilar por acción capilar, presión o succión). Luego se inicia la migración de los analitos por un campo eléctrico que se aplica entre los frascos de origen y de destino y se suministra a los electrodos de la fuente de alimentación de alta tensión. Los analitos separan ya que migran debido a su movilidad electroforética y se detectan cerca del extremo de salida del tubo capilar. La salida del detector se envía a un dispositivo de manipulación y salida de datos como un integrador de o la computadora. Los datos se muestran a continuación como una electroferograma, que informa la respuesta del detector en función del tiempo. Compuestos químicos separados aparecen como picos con tiempos diferentes de migración en un electroferograma.

Ventajas

Evitar el uso de presión para introducir la fase móvil en la columna, da como resultado una serie de ventajas importantes. En primer lugar, la presión por flujo a través de una columna depende directamente en la Plaza del diámetro de la partícula e inversamente de la longitud de la columna. Esto restringe la longitud de la columna y el tamaño de la partícula, tamaño de partícula es raramente inferior a 3 micrómetros y la longitud de la columna está restringida a 25 cm. eléctricamente conducido flujo tasa es independiente de la longitud de la columna y el tamaño. Una segunda ventaja del uso de electroosmosis para pasar la fase móvil en la columna es el enchufe como perfil de velocidad de flujo de EF reduce la dispersión del soluto en la columna, aumentando la eficiencia de la columna.

Véase también

  • Cromatografía de
  • Electroforesis
  • Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)
  • Electroforesis capilar
  • Electrocromatografía

Referencias

  • Smith, N. "Electrocromatografía capilar" disponible en:https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/Bibliography?DocName=AP8508ACECPrimer.pdf
  • Bartle, D. K. Electrocromatografía capilar Publicado por la Real Sociedad de química, Cambridge. ISBN 0-85404-530-9

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